Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui adanya pengaruh media e-booklet terhadap motivasi belajar dan hasil belajar siswa kelas X SMA Negeri 1 Ngemplak pada materi bioteknologi. Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah Quasi Eksperimen dengan pendekatan kuantitatif. Pengambilan sampel dilakukan melalui teknik Cluster Random Sampling. Teknik pengambilan data dilakukan dengan melalui proses observasi, wawancara, pembagian angket dan tes. Uji validitas dan reliabilitas angket dan butir soal dilakukan dengan menggunakan rumus Alpha Cronbach model Rasch. Hasil validitas dan reliabilitas angket dan butir soal diperoleh hasil valid dan reliabel. Teknik analisis data dilakukan dengan uji MANCOVA pada aplikasi Jamovi. Hasil uji menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang signifikan antara hasil belajar dan motivasi belajar siswa pada kelas kontrol dan kelas eksperimen. Berdasarkan hasil uji univariat pada aplikasi Jamovi hasil perhitungan menunjukkan bahwa pengaruh kelompok pada posttest hasil belajar siswa diperoleh hasil p = 0.005. Nilai p < 0>