;

Abstrak


Introduksi Konstruk CRISPR/CAS9 dalam Pengeditan Gen OSGA20Ox2 dan OSCKX2 pada Padi Mentik Wangi untuk Memperbaiki Karakter Tinggi Tanaman dan Meningkatkan Hasil Panen


Oleh :
Marina Ruzyati - S902008004 - Fak. MIPA

Mentik Wangi merupakan varietas padi unggul aromatik dari kelompok Japonica tropis dengan postur tinggi dan hasil panen rendah. Postur tanaman yang tinggi menyebabkan padi Mentik Wangi mudah rebah sehingga mengakibatkan kehilangan hasil panen. Penurunan tinggi tanaman dan peningkatan hasil panen Mentik Wangi perlu dilakukan. Gen OsGA20ox2 dan OsCKX2 bertanggung jawab atas karakter semi-dwarf dan hasil panen tinggi. Penelitian bertujuan untuk merakit kaset kontruk CRISPR/Cas9 yang membawa gRNA dari gen OsCKX2, memperoleh komposisi media regenerasi yang baik untuk padi Mentik Wangi, mengintoduksikan konstruk CRISPR/Cas9_gRNA_OsCKX2 dan CRISPR/Cas9_gRNA_OsGA20ox2 pada padi Mentik Wangi yang dimediasi oleh vektor Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404, serta mengidentifikasi mutan transforman Mentik Wangi berbasis analisis molekuler. Penelitian ini adalah penelitian eksperimental. Hasil penelitian menunjukkan bahwa modul kaset CRISPR/Cas9_gRNA_OsCKX2 telah berhasil dibuat dengan menggunakan metode kloning Golden gate, komposisi media regenerasi yang baik untuk padi Mentik Wangi adalah penambahan 10 mg/L antibiotik higromisin pada media seleksi dan mereduksi komponen antibiotik pada media regenerasi, introduksi kaset CRISPR/Cas9_gRNA_OsGA20ox2 dan CRISPR/Cas9_gRNA_OsCKX2 ke dalam padi Mentik Wangi menghasilkan 30 galur putatif transforman. Analisis PCR menunjukkan bahwa dari 30 galur, 18 galur positif untuk gen resisten higromisin serta mengindikasikan mutagenesis pada gen target OsGA20ox2 dan OsCKX2.