Jerawat adalah penyakit kulit yang banyak diderita masyarakat. Jerawat perlu ditangani karena dapat menimbulkan rasa sakit dan mengganggu penampilan. Cutibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis merupakan bakteri flora kulit yag memicu timbulnya jerawat. Senyawa antibakteri diperlukan untuk menghambat pertumbuhan bakteri C. acnes dan S. epidermidis. Daun adas (Foeniculum vulgare Mill.) berpotensi sebagai antibiotik alami karena mengandung senyawa metabolit sekunder. Tujuan penelitian ini adalah untuk menguji aktivitas antibakteri, mengetahui konsentrasi ekstrak etanol daun adas dengan daya hambat paling besar, mengetahui kandungan senyawa metabolit sekunder pada ekstrak etanol, serta mengetahui senyawa metabolit sekunder dalam ekstrak etanol daun adas yang memiliki aktivitas antibakteri terhadap C. acnes dan S. epidermidis. Uji antibakteri terhadap C. acnes dan S. epidermidis dilakukan menggunakan metode difusi sumuran. Penelitian ini dilakukan menggunakan empat jenis perlakuan berupa variasi konsentrasi ekstrak etanol daun yaitu 0,2 g/ml, 0,4 g/ml, 0,6 g/ml, 0,8 g/ml dengan pengulangan perlakuan dilakukan sebanyak empat kali. Kontrol positif berupa klindamisin 100 ppm dan kontrol negatif berupa DMSO 10%. Data dianalisis melalui uji Kruskal-Wallis menggunakan software SPSS 26. Diperoleh nilai signifikansi p = 0,001 < 0>C. acnes dan S. epidermidis pada konsentrasi 0,4 g/ml, 0,6 g/ml, dan 0,8 g/ml. Konsentrasi 0,8 g/ml memiliki daya hambat paling besar. Berdasarkan uji kromatografi lapis tipis diketahui ekstrak etanol daun adas mengandung golongan senyawa tanin, flavonoid, dan steroid. Uji bioautografi metode langsung menunjukkan bahwa tanin, flavonoid, dan steroid yang terkandung dalam ekstrak etanol daun adas memiliki aktivitas antibakteri terhadap C. acnes dan S. epidermidis.