PENGARUH PEMBERIAN RAGAM DOSIS ZPT TERHADAP PERTUMBUHAN SUB-KULTUR Dendrobium macrophyllum SECARA IN VITRO. Skripsi: Galih Henggar Jati (H0720072). Pembimbing: Andriyana Setyawati, S.P., M.P., Ph.D., Gani Cahyo Handoyo, S.P., M.Si., dan Ir. Retna Bandriyati Arniputri, M.S. Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Sebelas Maret (UNS) Surakarta.Anggrek Dendrobium macrophyllum (D. macrophyllum) dikenal dengan nilai ekonomi dan farmakologisnya yang tinggi, namun saat ini ketersediaan tanaman D. macrophyllum di alam semakin menurun akibat eksploitasi dan pertumbuhannya yang lambat. Salah satu solusi efektif untuk memperbanyak dan memperbaiki kualitas tanaman D. macrophyllum adalah melalui kultur in vitro dengan aplikasi zat pengatur tumbuh (ZPT) seperti auksin dan sitokinin. Teknik ini mampu mengoptimalkan pertumbuhan tanaman serta produksi senyawa metabolit sekunder, sehingga mendukung konservasi dan pemanfaatan anggrek ini sebagai tanaman obat bernilai tinggi. Media yang digunakan adalah Murashige and Skoog (MS) dengan ZPT 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) sebagai auksin dan thidiazuron (TDZ) sebagai sitokinin. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh berbagai konsentrasi dari 2,4-D dan TDZ yang tepat untuk menghasilkan hasil yang terbaik pada pertumbuhan dan metabolit sekunder anggrek D. macrophyllum.Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Fisiologi dan Bioteknologi Tumbuhan, Fakultas Pertanian, Universitas Sebelas Maret Surakarta; Laboratorium Kimia Universitas Pendidikan Indonesia Bandung, Jawa Barat pada bulan Februari-Juni 2024. Penelitian menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) faktorial dengan dua faktor. Faktor yang pertama yaitu auksin 2,4-D (Tanpa 2,4-D; 0,5; 1; dan 1,5 ppm) dan faktor kedua yaitu sitokinin TDZ (Tanpa TDZ; 0,5; 1; dan 2 ppm). Terdapat 16 macam kombinasi perlakuan yang diulang sebanyak 3 kali, sehingga diperoleh 48 satuan percobaan. Variabel yang diamati dalam penelitian yaitu waktu muncul daun, jumlah daun, panjang daun, waktu muncul tunas, jumlah tunas, tinggi tanaman, bobot segar, dan analisis senyawa metabolit sekunder. Analisis data menggunakan analisis ragam (ANOVA) dengan taraf 5% dengan uji lanjut Duncan Multiple Range Test (DMRT) dengan taraf 5% serta analisis regresi untuk mengetahui arah hubungan variabel bebas dan terikat.Hasil penelitian menunjukkan bahwa aplikasi 2,4-D 1,5 ppm meningkatkan waktu muncul tunas yang jauh lebih cepat 25,58 hari atau sekitar 59,13% dari perlakuan kontrol, namun pemberian 2,4-D dengan taraf konsentrasi yang digunakan cenderung menurunkan bobot segar tanaman. Pemberian TDZ belum mampu untuk meningkatkan seluruh parameter pertumbuhan tanaman yang diamati. Tidak terjadi interaksi antara 2,4-D dan TDZ pada seluruh parameter yang diamati. Berdasarkan analisis GCMS yang telah dilakukan didapat data bahwa aplikasi 2,4-D dan TDZ belum mampu menginduksi senyawa metabolit sekunder pada tanaman anggrek D. macrophyllum.