Cempo Ireng merupakan padi hitam asal Sleman yang memiliki umur panen lama, postur tinggi, dan produktivitasnya rendah. Hal tersebut menjadi faktor pembatas para petani untuk membudidayakan meskipun memiliki kandungan antosianin yang tinggi. Upaya untuk mengatasi permasalahan tersebut yaitu induksi mutasi dengan iradiasi sinar gamma dan telah menghasilkan galur harapan (8, 51, dan 52) dengan berumur genjah, tinggi tanaman 140,26 cm, dan produktivitasnya 4,71 ton/ha, tetapi belum tahan terhadap wereng batang coklat (WBC). Penelitian ini merupakan penelitian lanjutan dari perlakuan iradiasi sinar gamma 200 Gy terhadap tiga galur harapan padi hitam UNS guna memperbaiki sifat ketahanan WBC dan menambah keragaman genetik. Penelitian ini bertujuan mengetahui perubahan karakteristik morfologi galur harapan hasil iradiasi sinar gamma dan mendapatkan individu yang unggul. Penelitian dilaksanakan di lahan persawahan Desa Pakahan, Jogonalan, Klaten pada bulan Februari - Juli 2022 dengan menggunakan sistem jajar legowo 8:1. Pengamatan 25 karakter morfologi dilakukan pada 30 tanaman setiap galurnya dan didasarkan pada buku panduan Sistem Karakterisasi dan Evaluasi Tanaman Padi 2003. Analisis data dilakukan secara deskriptif dan kualitatif menggunakan uji Chi Kuadrat dengan nilai Chi Kuadrat tabel pada signifikan 5%. Hasil penelitian menunjukkan terdapat perubahan 17 karakter morfologi pada populasi M3 padi hitam hasil iradiasi sinar gamma. Seleksi individu menghasilkan 12 tanaman mutan yaitu pada M3(GH8')-3, M3(GH8')-7, M3(GH51')-6, M3(GH51')-22, M3(GH51')-25, M3(GH52')-3, M3(GH52')-8, M3(GH52')-16, M3(GH52')-18, M3(GH52')-22, M3(GH52')-26, M3(GH52')-30.