Tujuan penelitian ini adalah untuk menguji kelayakan e-booklet Biossy (Biotechnology Is Easy) sebagai suplemen bahan ajar materi bioteknologi serta mengetahui respon minat siswa terhadap e-booklet yang dikembangkan. Penelitian ini merupakan penelitian research and development dengan model 4D dari Thiagarajan dengan tahap define, design, development dan disseminate. Subjek penelitian berupa siswa kelas XE 3 SMAN 2 Sukoharjo. Pengambilan sampel dilakukan dengan purposive sampling. Teknik pengumpulan data melalui kuesioner, observasi dan wawancara. Uji kelayakan dlakukan oleh ahli materi, ahli media dan ahli pembelajaran. Teknik analisis data yang digunakan adalah one sample t-test untuk melihat respon minat siswa terhadap produk yang dikembangkan. Hasil penelitian didapatkan rata-rata dari hasil uji kelayakan oleh ahli media sebesar 90,3%, ahli materi sebesar 85,6% dan ahli pembelajaran sebesar 98,5%. Hasil uji coba terbatas memperoleh prosentase sebesar 82,8?ri siswa dan 90,4% penilaian dari guru. Uji coba lapangan memperoleh 87,4?ri siswa dan 99% penialaian dari guru. E-booklet Biossy (Biotechnology Is Easy) dinilai memiliki dampak positif dan signifikan terhadap minat belajar siswa, hal ini dilihat dari perolehan nilai uji t hitung yang lebih besar dibanding nilai t tabel (12,896 > 1,690) berdasarkan pengujian menggunakan uji one sample t-test. Disimpulkan bahwa media layak digunakan sebagai suplemen bahan ajar biologi pada materi bioteknologi kelas X serta dapat meningkatkan minat belajar siswa.