Cincau hijau (Cocculus orbiculatus) merupakan salah satu jenis cincau hijau rambat yang memiliki banyak manfaat di bidang kesehatan dan sebagai bahan makanan. Produktivitas cincau dari tahun 2016 hingga 2021 terus mengalami penurunan, sehingga diperlukan upaya untuk meningkatkannya kembali. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh komposisi media tanam dan PSB terhadap pertumbuhan cincau hijau. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Kelompok Lengkap (RAKL) faktorial. Faktor pertama adalah komposisi media tanam, yaitu tanah+biochar (2:1), tanah+pupuk+biochar (1:1:1), tanah+pupuk+biochar (2:2:1), dan tanah+pupuk(2:1). Faktor kedua adalah konsentrasi PSB yaitu tanpa PSB, 10 ml.l^-1, 15 ml.l^-1, dan 20 ml.l^-1. Data dianalisis menggunakan ANOVA dan uji lanjut DMRT pada taraf 5%. Hasil penelitian menunjukkan Penggunaan komposisi media tanam tanah + pupuk + biochar (2:2:1) dengan PSB 10 ml.l^-1dapat  meningkatkan tinggi tanaman pada 6  MST (146,3 cm) serta jumlah daun pada 6 MST (42 helai). Penggunaan komposisi media yang sama dengan PSB 15 ml.l^-1 dapat meningkatkan kadar pektin (3,65%). Penggunaan komposisi media tanah, pupuk, dan biochar (2:2:1) dapat  meningkatkan tinggi tanaman (143,3 cm), jumlah daun (42,3 helai), luas daun (1152,0 cm), bobot segar brangkasan (40,07 g),  bobot kering brangkasan (11,2 cm), dan kandungan klorofil (0,183 mg/g) dibandingkan pada penggunaan komposisi media yang lain. Pemberian PSB 10 ml.l^-1 dapat meningkatkan jumlah daun (42 helai) dibandingkan dengan pemberian konsentrasi yang lain.