Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui genotip yang dihasilkan dari Myostatin (MSTN) Del-11bp ekson 3 dan fenotip yang ditampilkan pada persilangan sapi Belgian Blue serta perbandingannya dengan sapi lainnya di Indonesia. Gen MSTN Del-11bp pada ekson 3 membawa sifat otot ganda atau double muscle pada sapi Belgian Blue. Sampel darah sapi yang digunakan berjumlah 29 dengan 2 sampel darah sapi kontrol. Sampel darah terdiri dari 2 sampel sapi Belgian Blue, 3 sampel sapi persilangan Belgian Blue × PO, 5 sampel sapi Simmental, 5 sampel sapi Limousin, 5 sampel sapi SimPO, 5 sampel sapi LimPO, 2 sampel sapi Madura, 2 sampel sapi Bali, dan 2 sampel sapi Nellore. Amplifikasi gen MSTN pada ekson 3 menggunakan primer forward 5’- CTCTTCTTTCCTTTCCATACAGAC-‘3 dan primer reverse 5’- AGGGGAAGACCTTCCATGTT-‘3 dengan ukuran produk PCR 451bp. Metode RFLP gen MSTN Del-11bp pada ekson 3 menggunakan enzim NmuCI dengan Buffer R. Gen MSTN Del-11bp hanya ditemukan pada sapi Belgian Blue dan heterozigot pada sapi persilangan Belgian Blue × PO serta tidak ditemukan pada sapi lainnya di Indonesia. Melalui metode PCR-RFLP, genotip yang terobservasi adalah [del11/del11], [del11/+], dan [+/+].