Mentimun merupakan tanaman hortikultura dari famili Cucurbitaceae yang digemari masyarakat Indonesia. Produksi mentimun (Cucumis sativus L.) di Indonesia tergolong fluktuatif karena dipengaruhi oleh iklim ekstrim. Kondisi ini menyebabkan adanya variasi ketersediaan air lingkungan yang mengganggu pertumbuhan dan pembungaan mentimun. Salah satu upaya untuk meningkatkan ketahanan tanaman mentimun terhadap kondisi air di lingkungan yang berbeda-beda adalah dengan aplikasi hormon brassinosteroid. Tujuan penelitian ini adalah mengetahui pengaruh pemberian dan konsentrasi optimal hormon brassinosteroid terhadap pertumbuhan dan pembungaan tanaman mentimun yang tumbuh pada berbagai variasi ketersediaan air. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 2 faktor dan 4 ulangan. Faktor pertama, variasi kapasitas lapang yaitu 100%, 60%, dan 40%. Faktor kedua konsentrasi hormon brassinosteroid dengan variasi 0 ppm, 0.5 ppm, 1 ppm, dan 2 ppm. Penanaman mentimun dilakukan hingga 40 hari atau hingga fase generatif. Pemberian hormon brassinosteroid dilakukan melalui foliar spray pada abaksial daun muda. Hasil penelitian menunjukkan bahwa brassinosteroid meningkatkan pertumbuhan dan pembungaan tanaman mentimun yang tumbuh pada variasi ketersediaan air. Hormon brassinosteroid yang optimal untuk meningkatkan pertumbuhan dan meningkatkan kadar klorofil tanaman mentimun pada konsentrasi 0.5 ppm, sedangkan konsentrasi 2 ppm optimal dalam meningkatkan prolin dan pembungaan mentimun.