Probiotik harus memiliki produktivitas tinggi dan mampu tumbuh media ekonomis untuk dikembangkan dalam skala industri. Penelitian ini bertujuan menentukan konsentrasi molase pada media jus kubis yang paling optimum untuk produksi probiotik L. lactis dan L. garvieae asal saluran pencernaan ikan tor serta menentukan suhu inkubasi, pH media, dan lama waktu inkubasi yang paling optimum untuk produksi probiotik L. lactis dan L. garvieae asal saluran pencernaan ikan tor. Penelitian bersifat eksperimental diawali dengan optimasi media berupa perlakuan jus kubis 100?n jus kubis dengan penambahan molase (0%, 3%, 4%, 5%) serta lama waktu inkubasi (0, 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24) menggunakan RAL. Media dan lama waktu inkubasi terbaik digunakan untuk optimasi kondisi pertumbuhan dengan rancangan faktorial 2x3 berupa suhu inkubasi (25°C dan 30°C) serta pH awal media (6, 7, dan 8). Pertumbuhan bakteri ditentukan dengan mengetahui jumlah sel menggunakan biophotometer dengan absorbansi pada λ = 600 nm. Data jumlah sel untuk optimasi media dan lama waktu inkubasi dianalisis secara deskriptif, sedangkan data suhu inkubasi dan pH media dianalisis secara statistik dengan Anova dan uji DMRT menggunakan IBM SPSS Statistic 26 untuk menentukan optimasi yang menghasilkan produktivitas sel terbaik.