Latar Belakang: Diabetes melitus tipe 2 (DM tipe 2) adalah penyakit metabolik kronis dengan prevalensi yang terus meningkat dan ditandai oleh resistensi insulin, disfungsi sel β, serta stres oksidatif. Terapi konvensional seperti metformin memiliki efek samping berupa gangguan pencernaan, asidosis laktat dan defisiensi B12, sehingga diperlukan alternatif yang lebih aman. Mesokarp semangka mengandung senyawa bioaktif dengan aktivitas antioksidan yang berpotensi memodulasi metabolisme sel melalui jalur AMPK.Tujuan: Menganalisis pengaruh pemberian ekstrak etanol mesokarp semangka merah (EEMSM) terhadap kadar glukosa darah puasa, insulin, HOMA-β, HOMA IR, kadar AMPK dan malondialdehyde (MDA) serum pada tikus Wistar jantan model DM tipe 2.Metode: Kandungan fitokimia EEMSM diuji menggunakan uji spektrofotmetri UV-Vis. Penelitian in vivo dengan rancangan pre-posttes with control group design untuk semua parameter DM tipe 2 GDP diuji menggunakan GOD-PAP, insulin diuji menggunakan ELISA, HOMA-β, HOMA-IR, AMPK diuji menggunakan ELISA, dan MDA diuji menggunakan TBARS,. Sebayak 36 ekor tikus jantan dibagi menjadi enam kelompok: KN (tikus normal), K- (induksi STZ-NA), K+ (Induksi STZ-NA + metformin 45 mg/kgBB), dan P1, P2, P3 (induksi STZ-NA + EEMSM dosis 500, 1000, dan 1500 mg/kgBB). Intervensi dilakukan selama 14 hari. Data dianalisis dengan uji normalitas dan paired T-test, kemudian dilanjut dengan one-way ANOVA atau Kruskal-Wallis dengan nilai signifikan jika p<0>Hasil: Ekstrak etanol mesokarp semangka merah mengandung flavonoid (0,40%), fenolik (0,40%), dan alkaloid (1438,03 µg/ml). Pemberian EEMSM dengan dosis 1500 mg/kgBB menunjukkan hasil paling signifikan dibanding kelompok K+ (p<0>Kesimpulan: Ekstrak etanol mesokarp semangka merah memiliki potensi sebagai agen antidiabetik melalui perbaikan profil glukosa darah, peningkatan fungsi sel β pankreas, penurunan resistensi insulin, penurunan stres oksidatif, serta aktivasi AMPK.