Infeksi bakteri merupakan salah satu masalah kesehatan global yang cukup serius karena merupakan salah satu penyebab kematian utama di dunia. Daun jambu biji (Psidium guajava L.) adalah bahan alam yang mengandung flavonoid, tanin, dan saponin, sedangkan lidah buaya (Aloe vera L.) mengandung senyawa saponin, antrakuinon, dan flavonoid yang telah diketahui memiliki aktivitas antibakteri. Penelitian sebelumnya menyatakan bahwa ekstrak suatu tanaman dapat menimbulkan efek sinergis dan memberikan aktivitas antibakteri yang lebih tinggi apabila dikombinasikan. Karena kandungan metabolit sekunder bahan alam sangat dipengaruhi oleh faktor lingkungan, waktu panen, dan metode ekstraksi, maka standardisasi perlu dilakukan. Oleh sebab itu, penelitian ini bertujuan untuk melakukan standardisasi ekstrak daun jambu biji dan lidah buaya serta mengevaluasi aktivitas antibakteri kombinasi keduanya. Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah penelitian eksperimental. Ekstraksi tanaman dilakukan dengan metode maserasi dengan bantuan gelombang ultrasonik menggunakan pelarut etanol 96%. Dilakukan standardisasi parameter spesifik dan non spesifik. Uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan menggunakan metode difusi cakram. Hasil dari penelitian menunjukkan bahwa standardisasi parameter spesifik dan non spesfik telah memenuhi standar yang ada di Farmakope Herbal Indonesia. Aktivitas antibakteri kombinasi ekstrak daun jambu biji dan lidah buaya dengan konsentrasi perbandingan 1:1 terbukti paling besar (21,22 mm) dibandingkan kontrol positif (15,72 mm), kontrol negatif (0 mm), ekstrak daun jambu biji (17,49 mm), dan ekstrak lidah buaya (8,43 mm).