Ekspresi p53 pada sel hela terhadap pemberian fraksi aktif pandanus conoideus lam. varietas buah kuning
Penulis Utama
:
Wahyu Prihastuti
NIM / NIP
:
M0406017
×ABSTRAK
Kanker serviks merupakan jenis kanker yang paling banyak menyebabkan kematian di Indonesia.
Penyebab terjadinya kanker serviks diduga karena adanya mutasi gen p53. Mutasi dari p53
menyebabkan terjadinya penurunan mekanisme apoptosis sehingga menyebabkan pertumbuhan sel
yang tidak terkontrol. Usaha penyembuhan kanker serviks dengan pembedahan, kemoterapi dan
radioterapi pada umumnya belum mampu memberikan hasil yang efektif. Hal ini mengakibatkan banyak
dijumpai cara-cara pengobatan alternatif antara lain dengan obat herbal. Pandanus conoideus Lam.
varietas buah kuning merupakan salah satu tanaman yang terbukti secara empiris memiliki aktivitas
sebagai anti kanker, karena memiliki kandungan karoten, beta-karoten dan α-tokoferol yang cukup
tinggi. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antiproliferasi, induksi apoptosis dan ekspresi
gen p53 oleh fraksi P. conoideus Lam. varietas buah kuning terhadap sel kanker serviks HeLa dengan
media pertumbuhan RPMI 1640 secara in vitro.
Aktivitas antiproliferasi dihitung dengan metode direct counting menggunakan haemocytometer
dan pewarnaan tryphan blue. Media yang digunakan untuk menumbuhkan sel adalah media RPMI 1640,
dengan perlakuan fraksi P. conoideus Lam. varietas buah kuning yang didapatkan dari I Made Budi.
Kinetika antiproliferasi diamati melalui penghitungan jumlah sel hidup dalam suatu interval waktu
tertentu untuk menentukan nilai doubling time sel. Proses apoptosis diidentifikasi melalui gambaran
mikroskopis morfologi sel dengan pengecatan immunohistokimia dengan antibodi monoklonal anti p53
dan antibodi sekunder anti mouse IgG dan anti rabbit IgG.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa fraksi P. conoideus Lam. varietas buah kuning mampu
menurunkan proliferasi sel, yaitu sebesar 1,834 kali lebih lama pada konsentrasi mendekati LC50
(0.0309625 μl/mL), sedangkan untuk konsentrasi 0.0097656 μl/mL terjadi perpanjangan 1,297 kali, pada
konsentrasi 0.01953125 μl/mL terjadi perpanjangan 1,509 kali dan konsentrasi 0.078125 μl/mL terjadi
perpanjangan 2,167 kali dibandingkan kontrol dan pemberian fraksi P. conoideus Lam. varietas buah
kuning mampu menurunkan tingkat ekspresi gen p53 mutan pada sel HeLa secara in vitro yang
ditunjukkan dengan penurunan kemampuan mitosis ketika konsentrasi P. conoideus Lam. varietas buah
kuning ditingkatkan serta P. conoideus Lam. varietas buah kuning juga dapat menginduksi terjadinya
apoptosis.
ABSTRACT
In Indonesia, cervical cancer is the highest killer. Most likely, in cervical cancer case also
stimulate from gene mutation of p53. Genetic changes of p53 resulting of programmed death cell
(apoptosis) lost, cause of cell display uncontrolled growth. Many cancer treatment like surgery,
chemotherapy, and radiotherapy was uneffective. That is caused many alternative treatment such as
herbal medicine. Yellow fruit Pandanus conoideus Lam. was one of plants that have empirical study
became anticancer agent because the lack of carotene, beta carotene and α-tocopherol. The purpose of
this research is to find out the in vitro effect of the yellow fruit P. conoideus Lam. fraction on the
antiproliferation, apoptosis and expression of p53 of cervical cancer HeLa cell lines in RPMI 1640
medium in vitro.
Direct counting to measure the growth inhibitory effect, examined by staining the viable treated
cells using tryphan blue. RPMI 1640 used as medium to culture cell, and treatmented with yellow fruits
P. conoideus Lam. from I Made Budi. The proliferation kinetic was determined by count the cell number
in some interval time for determine the doubling time of the cells. The apoptotic process was examined
by observasing microscopic the cell morphology that was stained using immunohystochemistry with
primary monoclonal antibody anti p53 and secondary antibody anti mouse IgG and anti rabbit IgG.
As the result, yellow fruit P. conoideus Lam. fraction are able to decrease cell proliferation,
which is 1,834 longer on 0.0309625 μl/mL concentrate, 1,297 longer on 0.0097656 μl/mL, 1,509 longer
on 0.078125 μl/mL concentrate and 2,167 longer on 0.078125 μl/mL concentrate, comparison with
control and yellow fruit P. conoideus Lam. active fraction able to decrease p53 expression decline
mitotic and induced apoptosis .
×
Penulis Utama
:
Wahyu Prihastuti
Penulis Tambahan
:
-
NIM / NIP
:
M0406017
Tahun
:
2010
Judul
:
Ekspresi p53 pada sel hela terhadap pemberian fraksi aktif pandanus conoideus lam. varietas buah kuning
