Isolasi, Identifikasi dan Deteksi Gen Ice Nucleation Active Bakteri pada Tumbuhan Berdaun Lebar Di Jalur Pendakian Cemoro Sewu Gunung Lawu
Penulis Utama
:
Ria Karno
NIM / NIP
:
S901302007
×ABSTRAK
RiaKarno. NIM. S901302007. Isolasi, Identifikasi dan Deteksi Gen Ice
Nucleation Active Bakteri pada Tumbuhan Berdaun Lebar Di Jalur
Pendakian Cemoro Sewu Gunung Lawu. Pembimbing I: Prof. Drs. Sutarno,
M.Sc., Ph.D., Pembimbing II: Dr. Ari Susiolowati, M.Si. Tesis: Program Studi
Biosain, Program Pascasarjana, Universitas Sebelas Maret Surakarta. 2014.
Bakteri Ice Nucleation Active (INA) adalah bakteri filosfer yang mampu
menyebabkan luka beku (frost injury) pada permukaan daun tanaman dan
berperan dalam biopresipitasi. Penelitian dan informasi tentang bakteri INA di
daerah subtropis telah banyak dilakukan, namun di daerah tropis masih sedikit.
Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan isolat, menentukan spesies
berdasarkan gen penyandi 16S rRNA dan mengetahui hubungan kekerabatan
bakteri INA yang diisolasi dari tumbuhan berdaun lebar di jalur pendakian
Cemoro Sewu, Gunung Lawu yaitu 6 spesies tumbuhan berdaun lebar serta
mengetahui gen penyandi protein pembentuk inti es bakteri INA.
Isolasi bakteri INA dilakukan dengan metode spread plate pada media
Nutrient agar + gliserol (NAG) dan media King’s B. Aktivitas nukleasi es
ditentukan dengan metode tube nucleation test menggunakan circulating alcohol
bath. Estimasi populasi ditentukan berdasarkan tabel MPN. Amplikon gen 16S
rRNA dilakukan dengan Polymerase Chain Reaction (PCR) menggunakan 63
forward primer dan 1387 reverse primer. Hubungan kekerabatan ditentukan
berdasarkan pohon filogenetik menggunakan program MEGA 5.1. Deteksi gen
ina dilakukan dengan PCR menggunakan primer forward dan reverse dari inaZ,
inaA, inaW serta inaX. Sekuens DNA dianalisis untuk mengetahui kemiripan
dengan gen daribakteri INA lain yang ada di situs NCBI secara online.
Hasil penelitian didapatkan 3 isolat bakteri INA. Isolat A2N4 dari
tumbuhan Dodonae viscose Jacq memiliki similaritas 96% dengan Pseudomonas
syringae. Isolat C2N9 dari tumbuhan Vaccinium laurifolium memiliki similaritas
97% dengan Pantoea sp dan isolat F1N6 dari tumbuhan Polygonum chinense L
yang teridentifikasi memiliki similaritas 98% dengan Pseudomonas sp. Populasi
bakteri yang ditemukan tergolong rendah yakni <3 x 103/g hingga 5,4 x 103/g
daun. Bakteri INA dari jalur pendakian Cemoro Sewu, Gunung Lawu dan bakteri
INA yang ditemukan sebelumnya memilki hubungan kekerabatan yang dekat.
Hasil analisis sekuens gen ina menunjukkan gen pada isolat A2N4 mempunyai
similaritas 99 % dengan gen pengkode ice nucleation protein pada Pseudomonas
syringae, strain INA4.
Kata kunci: Bakteri Ice Nucleation Active (INA), deteksi gen, filogenetik,
tumbuhan berdaun lebar, Cemoro Sewu, Gunung Lawu.
×
Penulis Utama
:
Ria Karno
Penulis Tambahan
:
-
NIM / NIP
:
S901302007
Tahun
:
2014
Judul
:
Isolasi, Identifikasi dan Deteksi Gen Ice Nucleation Active Bakteri pada Tumbuhan Berdaun Lebar Di Jalur Pendakian Cemoro Sewu Gunung Lawu
Edisi
:
Imprint
:
Surakarta - Pascasarjana - 2014
Program Studi
:
S-2 Biosains
Kolasi
:
Sumber
:
Kata Kunci
:
Jenis Dokumen
:
Tesis
ISSN
:
ISBN
:
Link DOI / Jurnal
:
-
Status
:
Public
Pembimbing
:
1. Prof. Drs. Sutarno, M.Sc., Ph.D 2. Dr. Ari Susiolowati, M.Si
Penguji
:
Catatan Umum
:
Fakultas
:
Sekolah Pascasarjana
×
File
:
Harus menjadi member dan login terlebih dahulu untuk bisa download.