ABSTRAK Rokok dapat membahayakan kesehatan. Asap rokok mengandung banyak radikal bebas dan komponen yang bersifat mutagen dan karsinogen yang dapat mempengaruhi sel-sel yang sedang aktif membelah termasuk sel-sel spermatogenik pada testis. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh paparan asap rokok terhadap spermatogenesis dan kualitas spermatozoa mencit (Mus musculus L.) galur Swiss. Penelitian ini dilakukan dengan cara memberi paparan asap rokok selama 32 hari pada mencit yang dikelompokkan menjadi 5 perlakuan yaitu 0, 1, 2, 3, dan 4 batang rokok/hari/5 mencit tiap kandang perlakuan. Parameter yang diamati adalah jumlah sel spermatogenik dan lapisan sel spermatogenik tiap penampang melintang tubulus seminiferus serta kualitas spermatozoa yang meliputi morfologi, kecepatan gerak, motilitas, dan viabilitas spermatozoa. Data yang diperoleh dianalisis menggunakan ANOVA dan dilanjutkan dengan uji DMRT taraf signifikansi 5%. Hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa paparan asap rokok selama 32 hari dapat menghambat proses spermatogenesis secara nyata yang ditandai dengan penurunan jumlah sel-sel spermatogonium, spermatosit primer, spermatid, dan lapisan sel spermatogenik serta penurunan kualitas spermatozoa secara nyata yang ditandai dengan penurunan persentase spermatozoa normal, penurunan kecepatan gerak spermatozoa, penurunan persentase motilitas spermatozoa, dan penurunan persentase spermatozoa hidup pada mencit (Mus musculus L.).