ABSTRAKTemulawak  (Curcuma  xanthorrizha)  merupakan  salah  satu  jenis  tanamanbiofarmaka. Sebagai bahan baku obat, selain produksi  rimpang  tinggi,  temulawak  jugaharus  bermutu  tinggi.  Badan  Pengawasan  Obat  dan  Makanan  (BPOM)  menegaskanbahwa  obat  dari  bahan  alami  atau  yang  biasa  disebut  dengan  obat  herbal  harusmemenuhi  persyaratan  yang  meliputi  mutu,  keamanan,  dan  khasiat.  Meningkatnyapermintaan rimpang  telah mendorong meningkatnya permintaan akan bibit  temulawak,diperlukan alternatif  lain untuk penyediaan  bahan  tanaman dalam  jumlah  yang cukup.Upaya penyediaan bahan tanaman secara massal dalam waktu relatif singkat serta bebashama dan penyakit dapat dilakukan melalui  teknik kultur  jaringan. Penggunaan  teknikini masih  terkendala oleh  tingginya biaya bahan kimia khususnya zat pengatur  tumbuh(ZPT).  Berbagai  bahan  alami  dapat  digunakan  sebagai  substitusi  ZPT  salah  satunyaadalah  air  kelapa  dan  berbagai  ekstrak  bahan  organik.  Tujuan  penelitian  ini  adalahmengkaji  respon  eksplan  temulawak  (Curcuma  xanthhorhiza  Roxb.)  terhadappemberian air kelapa dan ekstrak buah pisang cavendish secara in vitro.Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  Februari  sampai  dengan  Mei  2016  diLaboratorium  Fisiologi  Tumbuhan  dan  Bioteknologi,  Fakultas  Pertanian,  UniversitasSebelas Maret Surakarta. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL)dengan faktor pertama adalah ekstrak buah pisang cavendish dengan 4 taraf konsentrasiyaitu 0 g/l, 50 g/l, 100 g/l, dan 150 g/l. Faktor kedua adalah air kelapa dengan 4  tarafkonsentrasi yaitu 0 ml/l, 100 ml/l, 150 ml/l, 200 ml/l. Pengamatan dilakukan  terhadapwaktu muncul tunas, waktu muncul daun dan waktu muncul akar, jumlah tunas, jumlahdaun  dan  jumlah  akar,  tinggi  tunas,  panjang  daun  dan  panjan  gakar.  Data  hasilpengamatan  dianalisis  secara  deskriptif  dan  analisis  sidik  ragam  dilanjutkan  uji  jarakberganda Duncan (DMRT).Hasil penelitian menunjukkan adanya pengaruh perlakuan air kelapa dan ekstrakbuah pisang cavendish  terhadap variable pengamatan. Penggunaan air kelapa 150 ml/ldan  150  g  ekstrak  buah  pisang  cavendish  pada  perlakuan  media  tanam  mampumempercepat  waktu  muncul  tunas,  meningkatkan  jumlah  tunas,  jumlah  daun  danpanjang daun.   Kata kunci : Bahan organik, metode kultur jaringan, temulawak.