ABSTRAK 
Tujuan penelitian ini yaitu untuk mengetahui efektivitas penambahan laktosa dalam pengencer Tris kuning telur terhadap kualitas spermatozoa epididimis yang dipreservasi pada suhu 3 - 5 °C. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Maret s/d September 2017 di Laboratorium Produksi Ternak, Program Studi Peternakan, Fakultas Pertanian, Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Sebanyak 15 buah cauda epididimis kambing Kacang digunakan sebagai sumber materi penelitian. Spermatozoa epididimis dikoleksi dengan metode kombinasi penyayatan, pembilasan dan penekanan cauda epididimis dengan larutan NaCl fisiologis (0,9% NaCl). Spermatozoa epididimis hasil koleksi dibagi kedalam empat falcon tube dan masing-masing diencerkan pengencer Tris kuning telur + 0 mM laktosa, pengencer Tris kuning telur + 15 mM laktosa, pengencer Tris kuning telur + 30 mM dan pengencer Tris kuning telur + 45 mM laktosa. Spermatozoa yang telah diencerkan kemudian disimpan dalam lemari es pada suhu 3 - 5 °C selama 72 jam. Kualitas spermatozoa epididimis yang dievaluasi meliputi persentase motilitas (% MOT), persentase spermatozoa hidup (% H), persentase abnormalitas (% ABNO) dan persentase membran plasma utuh (% MPU). Rancangan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu rancangan acak kelompok (RAK) dan data kualitas spermatozoa epididimis yang diperoleh dianalisis dengan analysis of variance (Anova), apabila terdapat beda nyata (p<0,05) dilanjutkan dengan uji lanjut Duncan’s Multiple Range Test (DMRT). Hasil penelitian menunjukkan tidak ada perbedaan pengaruh (P>0,05) pada penambahan beberapa level laktosa (0 mM, 15 mM, 30 mM dan 45 mM) dalam pengencer tris kuning telur selama penyimpanan 0 s/d 72 jam terhadap (% MOT), (% H), (% ABNO) dan (% MPU). Simpulan penelitian ini yaitu penambahan beberapa level laktosa dalam pengencer tris kuning telur tidak memberikan pengaruh yang nyata (p<0,05) terhadap kualitas spermatozoa cauda epididimis kambing kacang selama masa penyimpanan suhu 3 - 5 °C.  
Kata kunci: Kualitas spermatozoa epididimis, Level laktosa dan Preservasi