Pandemi COVID-19 merupakan krisis global yang dihadapi berbagai negara saat ini termasuk Indonesia. Sebagai upaya menghadapi krisis tersebut, pemerintah menghimbau masyarakat untuk mematuhi protokol kesehatan. Kepatuhan protokol kesehatan terjadi akibat proses mental pada individu. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui peran kecemasan dalam memediasi hubungan antara pengetahuan COVID-19 dan kepatuhan protokol kesehatan pada mahasiswa UNS. Penelitian dilakukan pada populasi mahasiswa aktif UNS berusia 19-24 tahun. Teknik sampling yang digunakan adalah proportionate stratified random sampling (421 responden). Instrumen yang digunakan dalam penelitian ini adalah Skala Kepatuhan Protokol Kesehatan, Skala Kecemasan, dan Tes Pengetahuan COVID-19.  Teknik analisis data menggunakan analisis regresi Ordinary Least Square (OLS) metode bootstrap. Hasil uji hipotesis menunjukkan bahwa: 1) pengetahuan COVID-19 signifikan berpengaruh terhadap kecemasan; 2) kecemasan signifikan berpengaruh terhadap kepatuhan protokol kesehatan; 3) pengetahuan COVID-19 signifikan berpengaruh terhadap kepatuhan protokol kesehatan; 4) terdapat pengaruh tidak langsung yang signifikan antara pengetahuan COVID-19 terhadap kepatuhan protokol kesehatan melalui kecemasan..Kesimpulan dari penelitian ini adalah kecemasan memediasi hubungan antara pengetahuan COVID-19 dan kepatuhan protokol kesehatan pada mahasiswa Universitas Sebelas Maret