Phalaenopsis atau anggrek bulan termasuk salah satu jenis anggrek yang populer di Indonesia. Ciri khas anggrek bulan yaitu memiliki warna bunga yang bervariasi, bentuk bunga berukuran besar, dan waktu mekar bunga lebih lama. Anggrek bulan termasuk salah satu anggrek lokal yang banyak digunakan sebagai tanaman induk untuk hibrida baru. Oleh karena itu, anggrek bulan mempunyai potensi untuk dikembangkan dengan poliploidisasi menggunakan kolkisin. Karakter morfologi merupakan salah satu indikator poliploidi. Karakterisasi morfologi bertujuan untuk menyeleksi anggrek yang memiliki sifat unggul untuk dapat dijadikan tetua dalam persilangan. Penelitian ini bertujuan untuk mengkaji karakteristik morfologi anggrek bulan hasil pemberian kolkisin. Penelitian ini dilakukan pada Desember 2021 – Maret 2022 di screenhouse Fakultas Pertanian, Universitas Sebelas Maret (UNS), Surakarta. Bahan penelitian yang digunakan yaitu Dtps. Shu Long Purple Queen x Ox King "3534?, Phal. Chain Xen Moment, dan Phal. Shu Long "TS2904? yang telah diberi perlakuan kolkisin konsentrasi 1000 ppm pada kuncup bunga. Pengamatan morfologi dilakukan berdasarkan buku Panduan Karakterisasi Tanaman Hias Anggrek. Variabel pengamatan berjumlah 35 karakter, meliputi karakterisasi bunga, tangkai, dan daun. Hasil pengamatan dianalisis secara deskriptif dan dokumentasi bagian tubuh anggrek khususnya pada bunga. Hasil penelitian menunjukkan karakter kuantitatif morfologi ketiga aksesi anggrek bulan hasil perlakuan kolkisin 1000 ppm memiliki ukuran panjang bunga, lebar bunga, lebar sepal lateral, panjang sepal lateral, ketebalan sepal dorsal, panjang sepal dorsal, ketebalan petal, dan lebar petal yang lebih besar dibandingkan dengan tanpa perlakuan kolkisin. Berdasarkan karakter kualitatif hanya Phal. Shu Long "TS2904? yang tidak memiliki perbedaan antara perlakuan kolkisin dan tanpa perlakuan kolkisin, sedangkan Dtps. Shu Long Purple Queen x Ox King "3534? dan Phal. Chain Xen Moment yang diberi perlakuan kolkisin dan tanpa perlakuan kolkisin mempunyai perbedaan pada bunga yaitu bentuk ujung sepal dorsal dan bentuk ujung sepal lateral.