Bioentrepreneurship merupakan cabang ilmu biologi yang melibatkan integrasi antara ilmu biologi dengan kewirausahaan. Materi pelajaran biologi yang mampu menumbuhkan sikap kewirausahaan di dalam proses pembelajarannya adalah materi bioteknologi melalui penggunaan media pembelajaran modul berbasis bioentrepreneurship. Latar belakang penelitian adalah permasalahan kurangnya sumber ajar atau bahan ajar yang digunakan dalam pembelajaran biologi khususnya materi bioteknologi. Penelitian ini bertujuan untuk mengembangkan dan mengetahui kelayakan modul berbasis bioentrepreneurship pada materi bioteknologi, serta mengetahui respons guru dan siswa terkait media pembelajaran modul berbasis bioentrepreneurship. Penelitian ini merupakan penelitian pengembangan atau Research and Development model 4D yang dimodifikasi menjadi 3D dengan tahapan Define, Design, Develop. Subjek penelitian adalah 1 ahli media, 1 ahli materi, 1 ahli pembelajaran, 3 guru biologi, dan 35 siswa kelas XII MIPA SMA yang telah mendapatkan pembelajaran materi bioteknologi. Teknik pengumpulan data pada penelitian ini adalah dengan angket lembar validasi ahli media, materi, dan pembelajaran serta angket respons guru dan siswa terhadap modul berbasis bioentrepreneurship. Analisis data yang digunakan adalah analisis data kualitatif berdasarkan saran perbaikan produk oleh ahli media, ahli materi, ahli pembelajaran, guru dan siswa, serta data kuantitatif menggunakan skala Likert dan uji Rasch. Hasil penelitian yang didapatkan adalah modul berbasis bioentrepreneurship pada materi bioteknologi yang telah divalidasi oleh ahli media, ahli materi, dan ahli pembelajaran. Hasil dari uji kelayakan oleh ahli media sebesar 100%, ahli materi sebesar 94,56%, dan ahli pembelajaran sebesar 97,22%, sehingga modul berbasis bioentrepreneurship pada materi bioteknologi dinyatakan sangat layak. Hasil respons guru biologi dan siswa terhadap modul berbasis bioentrepreneurship pada materi bioteknologi menunjukkan bahwa respons guru sangat baik dengan persentase 95% dan respons siswa baik dengan persentase 83,74%.