Datura metel L. merupakan salah satu spesies dari famili Solanaceae dan dikenal dengan nama “kecubung” di Indonesia. Kecubung termasuk tumbuhan beracun yang berpotensi untuk dimanfaatkan sebagai bioinsektisida, tetapi belum banyak dilaporkan tentang komponen kimianya di Indonesia. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan mengidentifikasi senyawa kimia dari ekstrak etanol daun Datura metel L. yang berasal dari Surakarta, Jawa Tengah. Isolasi dilakukan dengan metode ekstraksi (maserasi), fraksinasi dan purifikasi. Maserasi dilakukan dengan menggunakan etanol sebagai pelarut. Fraksinasi dan purifikasi dilakukan dengan menggunakan Kromatografi Vakum Cair (KVC) dan Kromatografi Kolom Gravitasi (KKG). Senyawa hasil isolasi diperoleh kristal jarum berwarna putih kekuningan. Identifikasi struktur isolat ditentukan berdasarkan data-data spektroskopi, seperti FTIR, 1H-NMR, dan 13C-NMR, serta dibandingkan dengan data literatur. Isolat diidentifikasi sebagai campuran senyawa ?-sitosterol dan stigmasterol yang merupakan golongan steroid. Senyawa ?-sitosterol dilaporkan untuk pertama kalinya dari daun Datura metel L. 

Kata kunci : Datura metel L., daun, ?-sitosterol, stigmasterol