Kombucha merupakan minuman fermentasi yang menghasilkan aroma dan rasa yang asam yang dihasilkan dari mikroorganisme. Kombucha dapat diinovasikan menjadi minuman fungsional, salah satunya menggunakan substrat lengkuas merah yang kaya akan senyawa bioaktif. Minuman kombucha dapat menghasilkan asam organik, total fenol, dan juga antioksidan yang berpotensi sebagai antibakteri. Lama fermentasi mempengaruhi kadar keasaman dan total kandungan fenolik dalam minuman kombucha lengkuas merah. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui pengaruh lama fermentasi kombucha lengkuas merah terhadap daya hambat antibakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli serta uji kadar alkohol kombucha lengkuas merah.Metode yang digunakan pada penelitian ini bersifat eksperimental. Bahan uji yaitu sampel kombucha lengkuas merah yang terdiri dari 3 bahan  yaitu sari lengkuas merah, starter kombucha lengkuas merah, serta glukosa. Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan terhadap S. aureus dan E. coli dengan metode sumuran dengan 3 replikasi. Pengamatan dilakukan  pada waktu fermentasi yang berbeda (hari ke 6,8,10 hari). Pengujian meliputi uji organoleptik (kekeruhan dan ketebalan nata), pH, dan evaluasi kadar alkohol kombucha lengkuas merah. Hasil penelitian menunjukkan lama fermentasi kombucha lengkuas merah berpengaruh terhadap aktivitas antibakteri. Lama fermentasi 8 hari menunjukkan diameter daya hambat paling tinggi pada uji aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus yaitu sebesar 13,05mm dan Escherichia coli yaitu sebesar 14,73±0,13mm. Analisis statistik menunjukkan perbedaan tidak signifikan terhadap 2 bakteri uji (p sig. < 0>Kombucha lengkuas merah memenuhi persyaratan standar halal dengan kadar alkohol <0>penampilan (keruh, nata bertambah tebal), dan pH>3 yaitu fermentasi pada hari ke-6, ke-8, ke-10 secara berturut turut yaitu sebesar 3,91±0,01, 3,62±0,26, dan 3,31±0,19.