Keanekaragaman hayati, terutama fungi memainkan peran yang sangat penting dalam ekosistem hutan, salah satunya sebagai pengurai yang mendukung siklus energi dan menjaga produktivitas primer tanah. Di Indonesia, penelitian mengenai potensi keanekaragaman makrofungi masih sangat terbatas. Kawasan lereng timur Gunung Lawu berpotensi sebagai habitat makrofungi, namun kawasan ini masih belum memiliki data mengenai keanekaragaman makrofungi. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui keanekaragaman spesies makrofungi dan pengaruh faktor abiotik seperti suhu udara, kelembapan udara, kelembapan tanah, pH tanah dan Intensitas cahaya terhadap keanekaragaman spesies makrofungi di kawasan lereng timur Gunung Lawu. Penentuan lokasi pengambilan sampel dilakukan secara purposive sampling, sedangkan pengambilan data keanekaragaman makrofungi dilakukan dengan menggunakan metode jelajah secara berulang. Data jumlah individu spesies makrofungi diolah menggunakan indeks Shannon-Wiener, kemudian dianalisis secara deskriptif. Uji korelasi Pearson dilakukan untuk mengetahui hubungan keanekaragaman makrofungi dengan faktor abiotik yang dianalisis menggunakan Software SPSS Statistiks 26 (Statistikal Product and Service Solutions). Hasil penelitian menunjukkan 32 spesies makrofungi yang berasal dari 20 Famili dengan indeks keanekaragaman makrofungi berada pada katergori sedang (1 yaitu Calocera cornea (Batsch) Fr. dan Hypholoma sp. Kemudian uji korelasi Pearson antara faktor abiotik dengan keanekaragaman spesies menunjukkan korelasi negatif yang sangat signifikan antara suhu udara dan intensitas cahaya, serta korelasi positif yang sangat signifikan antara kelembapan tanah dengan kelembapan udara dan pH tanah yang tidak menunjukkan pengaruh signifikan terhadap keanekaragaman spesies.