Bakteri lipolitik adalah bakteri yang mampu menghasilkan enzim lipase yang berpotensi sebagai agen biodegradasi lemak. Bakteri lipolitik dapat ditemukan pada tempat yang banyak mengandung lemak, salah satunya pada limbah cair industri kulit. Tujuan dari penelitian ini untuk mendapatkan isolat bakteri lipolitik yang berpotensi sebagai agen biodegrasi limbah cair industri kulit LIK Magetan dan mengetahui aktivitas enzim lipase bakteri dalam limbah cair industri kulit LIK Magetan. Penelitian ini dilakukan dengan beberapa tahap yaitu isolasi, skrining, uji aktivitas enzim lipase dan identifikasi bakteri lipolitik. Isolasi bakteri lipolitik menggunakan media minimal yang diperkaya minyak zaitun. Skrining bakteri lipolitik dengan media Rhodamine B agar. Aktivitas enzim ditentukan dengan metode spektrofotometri dengan substrat p-nitrofenil palmitate (p-NPP) pada ? = 410 nm. Isolat bakteri lipolitik yang memiliki aktivitas enzim yang tinggi pada setiap perlakuan diidentifikasi berdasarkan sekuen gen penyandi 16S rRNA menggunakan program Basic Local Alignment Search Tool (BLAST). Hasil penelitian ini diperoleh empat isolat bakteri lipolitik. Aktivitas enzim lipase paling tinggi dihasilkan dalam bentuk crude  enzyme. Bedasarkan tahap pengendapan enzim , isolat Q memiliki aktivitas enzim yang paling tinggi diantara isolat lainnya pada pengendapan fraksi 30-45%. Sekuen gen penyandi 16S rRNA menunjukkan isolat Q memiliki persentase kemiripan sebesar 100% dan diidentifikasi sebagai Stenotrophomonas maltophilia.

Kata Kunci : bakteri lipolitik, enzim lipase, identifikasi bakteri, limbah cair      industri kulit,  uji aktivitas enzim