Kultur jaringan anggrek Phalaenopsis sp. menjadi alternatif dalam meningkatkan perbanyakan, tetapi pada tahap aklimatisasi adalah masa yang rentan terhadap hidup plantlet. Penelitian bertujuan untuk mendapatkan jenis ZPT terbaik untuk pertumbuhan anggrek Phalaenopsis sp. var. astuty saat aklimatisasi. Penelitian dilaksanakan pada Februari-Agustus 2022 di Kecamatan Jaten, Kabupaten Karanganyar. Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) dengan faktor perendaman ZPT dan 5 perlakuan, yaitu (tanpa ZPT), NAA, IBA, IAA, dan Ga3. Setiap perlakuan terdapat tiga sampel dengan empat kali ulangan, sehingga terdapat 60 unit percobaan. Data yang diperoleh dianalisis dengan analisis ragam, uji kontras ortogonal, dan analisis korelasi pada taraf signifikan 5%. Hasil penelitian ditemukan bahwa perlakuan Ga3 meningkatkan persentase hidup dan pertumbuhan anggrek Phalaenopsis sp. var. astuty.  Variabel persentase hidup memiliki korelasi sangat kuat dengan jumlah akar (r=0.95), panjang akar (r=0.96), dan kehijauan daun (r=0.95).