Tujuan dari penelitian untuk mengevaluasi kualitas kimia sosis ayam dengan filler tepung chia seed dan tepung wortel dengan level substitusi yang berbeda. Desain penelitian menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) pola searah dengan 5 perlakuan dan 5 ulangan. Perlakuan penelitian meliputi tepung chia seed 0% dan tepung wortel 0% (L0), tepung chia seed 3% dan tepung wortel 0,75% (L1), tepung chia seed 6% dan tepung wortel 1,5% (L2), tepung chia seed 9% dan tepung wortel 2,25% (L3), tepung chia seed 12% dan tepung wortel 3% (L4). Variabel yang diamati meliputi uji kadar air, lemak, kolagen, dan protein dengan menggunakan FOSS Food Scan Near Infrared Spectroscopy (NIRS). Data penelitian ini dianalisis menggunakan Analysis of Variance (ANOVA) dan apabila terdapat pengaruh yang nyata maka dilanjutkan menggunakan uji Duncan’s Multiple Range Test. Hasil penelitian menunjukkan bahwa sosis ayam dengan substitusi filler tepung chia seed level 12% dan tepung wortel hingga level 3?rpengaruh sangat nyata (P<0>chia seed pada level 6% dan tepung wortel pada level 1,5% yang mampu meningkatkan kadar lemak, protein, dan kolagen sehingga dapat diaplikasikan pembuatan sosis ayam.