Nanopartikel perak-gelatin berhasil disintesis dengan metode hijau menggunakan supernatan bebas sel bakteri Streptomyces sp. SHP 22-7 dan gelatin sebagai reduktor. Tujuan penelitian ini untuk mengembangkan produk yang memiliki sifat antibakteri menggunakan metode ramah lingkungan dengan memanfaatkan sumber daya alam. AgNP-G disintesis melalui proses reduksi dengan pendekatan biologi dan prinsip kimia hijau. Hasil sintesis dianalisis menggunakan UV-Vis, TEM, PSA, FTIR, SEM-EDX, dan XRD. Aktivitas antibakteri dan evaluasi metrik hijau juga dilakukan untuk membuktikan sifat antibakteri dan sifat “hijau” dari proses sintesis. Proses reduksi AgNP-G diidentifikasi menggunakan UV-Vis menghasilkan SPR pada panjang gelombang 410 nm. Hasil TEM menunjukkan bentuk partikel spherical berukuran 21,87 nm. Hasil SEM menunjukkan morfologi kasar dengan AgNP yang menempel pada matriks biomolekul dan EDX mengonfirmasi berat atom Ag yang kecil (9,11%) disertai deteksi atom C, O, K, dan Na yang berasal dari biomolekul gelatin dan/atau protein supernatan bakteri. Hasil dari potensial zeta yaitu -24 mV menandakan stabilitas yang tinggi. Hasil FTIR menunjukkan keberhasilan stabilisasi ditandai adanya pergeseran pita serapan pada 3391, 1629, 1384, 1230, dan 1046 cm-1. Hasil XRD menunjukkan struktur kristalinitas dari AgNP-G adalah FCC dengan adanya amorf dari gelatin. AgNP-G menunjukkan adanya aktivitas antibakteri terhadap S. aureus dan E. coli. Evaluasi metrik hijau mengindikasikan proses sintesis bersifat “hijau” yang mendukung prinsip kimia hijau.