Penelitian  bertujuan  untuk  menganalisis  variasi  dan  sebaran  genotipe  gen HSP70 (member 2) pada puyuh petelur lokal (Coturnix coturnix japonica). Sampel yang digunakan adalah 48 sampel darah puyuh petelur lokal. Amplifikasi gen HSP70 mengunakan  primer  forward  5’-AGCGTAACACCACCATTC-  dan    reverse    5’-TGGCTCCCACCCTATCTC’-3 dengan  ukuran  produk  PCR  372  bp. RFLP gen HSP70 menggunakan enzim  TaqI (T↓CGA), Pada Gen HSP70 diperoleh 2 alel yaitu C dan T, dengan genotipe CC (182 bp), CT (182 bp, dan 190 bp). SNP yang diperoleh berbeda dari hasil in-silico dimana hanya tervisual 1 SNP saja. Frekuensi genotipe HSP70 CC (0,90), dan CT (0,10). Frekuensi alel C dan T yaitu 0,95 dan 0,05 %. Hasil analisis sequencing menunjukkan terjadinya mutasi pada sekuen ke-1455 c.1455T>C, dimana  mengkode  asam  amino  yang  sama  yakni  Phenylalanine.  Analisis  Hardy-Weinberg  menggunakan  chi-square  menunjukkan  adanya  kesetimbangan  (P<0>