Kesuburan tanah merupakan acuan dari sistem pertanian yang berkelanjutan. Penggunaan lahan yang intensif tanpa adanya pergiliran tanaman dapat mengakibatkan penurunan unsur hara, sehingga kesuburan tanah akan menurun. Pemetaan status kesuburan tanah perlu dilakukan sebagai acuan dalam melakukan pengelolaan yang tepat. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui status dan faktor penentu kesuburan tanah serta memberikan rekomendasi untuk mempertahankan ataupun meningkatkannya. Pengambilan sampel tanah dilakukan pada berbagai jenis penggunaan lahan di Kecamatan Ende, Ende. Penelitian ini menggunakan metode deskriptif eksploratif dengan pendekatan survei lapangan. Pengambilan sampel melalui metode purposive sampling dengan pengamatan lapangan dan analisis laboratorium. Penelitian ini menggunakan sumber keragaman jenis tanah (Alfisols), curah hujan (1102.34 mm/tahun), kelas kemiringan lereng (0-8%, 8-15%, 15-25%, dan 25-45%), dan jenis penggunaan lahan (hutan, kebun, padang rumput, dan tegalan) dengan 3 ulangan, sehingga terdapat 48 titik pengambilan sampel. Parameter yang diamatai meliputi pH aktual, pH potensial, N total, P tersedia, K tersedia, C organik, KTK, kejenuhan basa, C/N rasio, tekstur, dan biomassa C mikroba. Analisis data yang digunakan adalah Principal Component Analysis (PCA) untuk menentukan nilai Soil Fertility Index (SFI), dilanjutkan uji Pearson Correlation, analysis of variance (ANOVA), dan Duncan’s Multiple Range Test (DMRT) untuk mengetahui faktor penentu kesuburan tanah. Hasil penelitian menunjukkan Status kesuburan tanah pada berbagai jenis penggunaan lahan di Kecamatan Ende adalah sedang dan tinggi. Penggunaan lahan hutan (4.796,98 ha) memiliki status kesuburan tanah sedang. Sementara itu, penggunaan lahan padang rumput (8.505,59 ha), kebun (1.442,90 ha), dan tegalan (1.615,75 ha) memiliki status kesuburan tanah tinggi. Indikator yang menjadi faktor penentu kesuburan tanah adalah pH potensial, C organik, dan KTK. Rekomendasi untuk mempertahankan serta meningkatkan kesuburan tanah dapat dilakukan dengan pemberian kapur pertanian untuk lahan dengan nilai pH potensial rendah dan pemberian pupuk serta bahan organik untuk mempertahankan kandungan C organik dan KTK.