Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh subtitusi roti tawar afkir dengan level yang berbeda dalam pakan komplit kambing perah terhadap kecernaan bahan kering (KcBK) dan kecernaan bahan organik (KcBO) secara in vitro. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 4 perlakuan dan 4 ulangan. Perlakuan yang dilakuakan yaitu P1: Ransum 58% + Roti tawar afkir 35%, P2: Ransum 53% + Roti tawar afkir 40%, P3: Ransum 48% + Roti tawar afkir 45%, P4: Ransum 43% + Roti tawar afkir 50%. Metode yang digunakan adalah in vitro 2 tahap dengan tahap I pencernaan fermentatif (Rumen) dan tahap II pencernaan fermentatif dan hidrolisis (Total). Hasil penelitian menunjukan bahwa subtitusi roti tawar afkir dengan level 35%-50% pada tahap I pencernaan fermentatif tidak berpengaruh nyata terhadap nilai KcBK dan KcBO sedangkan pada tahap II pencernaan total menunjukan berpengaruh nyata terhadap nilai KcBK dan KcBO yaitu dengan nilai kecernaan tertinggi pada P4 yang menggunakan roti tawar afkir 50%. Kesimpulan dari penelitian ini adalah substitusi roti tawar afkir pada pakan komplit kambing perah hingga level 50% tidak mengganggu proses pencernaan pada ternak ditinjau dari nilai kecernaan bahan kering dan bahan organiknya. Nilai kecernaan bahan kering dan bahan organik dari pakan komplityang ditambahkan roti tawar afkir diperoleh hasil diatas 60% yang menunjukkan bahwa nutrien yang terkandung dalam pakan dapat dimanfaatkan oleh ternak untuk memenuhi kebutuhan nutriennya.Kata kunci : roti tawar afkir, in vitro, kecernaan bahan kering dan bahan organik