Latar Belakang: Kanker payudara tetap menjadi kanker yang paling umum pada wanita, dengan berbagai subtipe yang menunjukkan karakteristik molekuler yang berbeda. Penelitian ini mengkaji korelasi antara kadar estradiol dalam jaringan kanker payudara dan plasma pada pasien dengan overekspresi HER2 dan kanker payudara triple-negatif (TNBC) di RS Dr. Moewardi, Surakarta.Metode: Penelitian observasional analitik dengan desain kohort retrospektif, yang dilakukan antara Desember 2022 hingga Desember 2024. Penelitian ini difokuskan pada pasien yang didiagnosis dengan overekspresi HER2 dan TNBC. Kadar estradiol dalam sampel jaringan dari mastektomi dan plasma diukur menggunakan high-performance liquid chromatography-radioimmunoassay (HPLC-RIA).Hasil: Sebanyak 60 subjek dianalisis. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar estradiol plasma lebih tinggi pada kelompok HER2 (153,00 ± 125,00 pg/mL) dibandingkan dengan kelompok TNBC (103,00 ± 220,00 pg/mL), meskipun tidak ditemukan perbedaan yang signifikan secara statistik (p=0,398). Demikian pula, kadar estradiol dalam sampel jaringan tidak menunjukkan perbedaan signifikan antara kedua kelompok (p=0,496). Ditemukan korelasi positif yang signifikan antara kadar estradiol dalam plasma dan jaringan (p<0,001), yang menunjukkan bahwa kadar estradiol plasma dapat menjadi indikator yang dapat diandalkan untuk kadar estradiol jaringan.Kesimpulan: Tidak ada perbedaan signifikan pada kadar estradiol antara kelompok Overekspresi HER2 dan TNBC di jaringan maupun plasma. Temuan ini dapat mendukung penggunaan kadar estradiol plasma sebagai penanda non-invasif untuk kadar estradiol dalam jaringan. Penelitian multicenter lebih lanjut dengan jumlah sampel yang lebih besar disarankan.