Usaha peternakan itik di Indonesia dihadapkan pada tingginya biaya pakan akibat sebagian besar bahan baku masih diimpor serta kandungan serat tinggi pada pakan lokal yang sulit dicerna. Salah satu upaya untuk meningkatkan efisiensi pakan dan performa ternak adalah dengan modifikasi ransum melalui suplementasi enzim selulase, L-karnitin dan minyak ikan. Melalui suplementasi tersebut, penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi pengaruh suplementasi enzim selulase, L-karnitin dan minyak ikan dalam ransum terhadap performa itik Tegal jantan fase grower. Desain penelitian menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 5 perlakuan dan 4 kali ulangan sehingga terdapat 20 unit percobaan. Itik yang digunakan berumur 1 hari (DOD) dengan bobot awal 30-54 gram dan dipelihara sampai umur 70 hari. Perlakuan terdiri dari P0=ransum kontrol, P1=ransum kontrol + 0,1% enzim selulase, P2=ransum kontrol + 0,1% enzim selulase + 0,003% L-karnitin, P3= ransum kontrol + 0,1% enzim selulase + 0,003% L-karnitin + 2% minyak ikan tuna, dan P4=ransum kontrol + 0,1% enzim selulase + 0,003% L-karnitin + 2% minyak ikan lemuru. Pengamatan meliputi konsumsi pakan, PBBH, FCR, REP, REE, IOFC, panjang dan bobot saluran pencernaan, profil darah, serta histologi usus halus. Hasil penelitian menunjukkan bahwa suplementasi enzim selulase, L-karnitin dan minyak ikan berpengaruh sangat nyata (P<0,01) terhadap PBBH, panjang (duodenum, jejunum, ileum, dan sekum), bobot (ventrikulus, hati dan sekum), serta kedalaman kripta dan rasio VH:CD pada duodenum dan jejunum. Perlakuan berpengaruh nyata (P<0,05) terhadap bobot usus halus dan rasio VH:CD ileum. Namun, perlakuan berpengaruh tidak nyata (P>0,05) terhadap konsumsi pakan, FCR, REP, REE, tinggi vili, lebar vili, luas permukaan vili, kedalaman kripta ileum, serta kadar kolesterol, glukosa, HDL, LDL, dan trigliserida darah. Perlakuan dengan sumplementasi lengkap yaitu enzim selulase, L-karnitin dan minyak ikan (tuna atu lemuru) menunjukkan hasil terbaik pada PBBH, panjang dan bobot saluran pencernaan, rasio VH:CD duodenum, jejunum dan ileum, serta nilai IOFC. Kesimpulan penelitian suplementasi kombinasi enzim selulase 0,1%, L-karnitin 30 ppm dan minyak ikan 2% mampu meningkatkan performa itik Tegal jantan fase grower melalui perbaikan morfologi saluran pencernaan, peningkatan efisiensi pemanfaatan nutrien, serta memberikan keuntungan ekonomi terbaik.