Natrium siklamat merupakan pemanis buatan yang umum digunakan sebagai bahan tambahan pangan di Indonesia. Penggunaan siklamat diatur oleh Badan Pengawas Obat dan Makanan (BPOM) melalui penetapan Acceptable Daily Intake (ADI). Namun, berbagai laporan menunjukkan kandungan siklamat yang melebihi batas di masyarakat sehingga menimbulkan kekhawatiran terkait dampak negatif seperti toksisitasnya. Pengujian toksisitas dan efek teratogenik diperlukan untuk menilai dampak negatif pemanis buatan natrium siklamat. Hewan model yang dapat digunakan untuk hewan model skrining awal terkait efek toksisitas dan teratogenik yaitu zebrafish (Danio rerio). Hasil penelitian diharapkan menjadi dasar ilmiah untuk meningkatkan upaya pengawasan dan penerapan regulasi penggunaan pemanis buatan siklamat.Metode penelitian toksisitas dan pengamatan efek teratogenik dilakukan menggunakan metode OECD Test Guideline No. 236 Fish Embryo Acute Toxicity (FET) test selama 96 hpf. Metode ini menggunakan embrio zebrafish yang dipaparkan larutan natrium siklamat berbagai konsentrasi. Uji diawali dengan uji rentang lalu dilanjutkan dengan uji toksisitas definitif. Uji toksisitas dilakukan untuk menentukan nilai LC₅₀ serta menganalisis efek subletal paparan siklamat pada embrio zebrafish. Penentuan nilai LC₅₀ dengan analisis probit. Parameter data detak jantung dan daya tetas dianalisis kenormalan data lalu dilanjutkan uji One-Way ANOVA dan uji Tukey. Parameter data perikardial edema dan malformasi tulang belakang dianalisis secara deskriptif.