Musuh alami memegang peranan penting dalam ekosistem persawahan dalam mencapai keseimbangan populasi hama.  Sistem tanam jajar legowo merupakan sistem tanam yang memberikan ruang kosong pada barisan tanaman yang diduga dapat mempengaruhi jenis dan dinamika populasi musuh alami. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh penerapan sistem tanam jajar legowo terhadap jenis dan populasi musuh alami hama padi. Penelitian dilaksanakan pada bulan April-Juni 2022 di Desa Karanglo, Polanharjo, Klaten dan Laboratorium Hama dan Penyakit Tumbuhan, Fakultas Pertanian, Universitas Sebelas Maret. Penelitian dilakukan di lahan sawah dengan sistem tanam konvensional (tegel) dan jajar legowo 2:1. Variabel yang diamati adalah jenis dan populasi predator dan parasitoid serta tingkat parasitisasi hama padi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa jenis-jenis predator yang ditemukan pada lahan konvensional dan jajar legowo tidak berbeda. Penerapan sistem tanam jajar legowo meningkatkan populasi laba-laba Paederus dan Tetragnatha.