Daun seibu (Achillea millefolium L.) merupakan tanaman herbal potensial yang kaya akan flavonoid tetapi belum banyak dibudidayakan di Indonesia. Penelitian ini bertujuan untuk mengoptimalkan pertumbuhan dan hasil tanaman melalui aplikasi pupuk kandang sapi dan asam humat. Penelitian dilaksanakan pada bulan November 2025 hingga Februari 2026 di lahan percobaan UNS Jumantono, Karanganyar, Jawa Tengah, menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) faktorial dengan dua faktor: pupuk kandang sapi (0, 10, 20, 30 ton/ha) dan asam humat (0, 42, 84, 167 kg/ha). Data dianalisis menggunakan ANOVA dan DMRT pada taraf signifikansi 5%, kemudian dilakukan analisis regresi polinomial (kuadratik) untuk menentukan pola hubungan antara dosis perlakuan dengan variabel yang diamati, serta analisis korelasi untuk menilai kekuatan hubungan antarvariabel penelitian. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pupuk kandang sapi dengan dosis 30 ton/ha meningkatkan bobot segar dan kering brangkasan. Asam humat dengan dosis 84 kg/ha meningkatkan jumlah anakan, sedangkan dosis 42 kg/ha meningkatkan tinggi tanaman. Tidak terdapat interaksi antara pemberian dosis pupuk kandang sapi dan asam humat terhadap seluruh parameter pertumbuhan dan hasil tanaman daun seribu (Achillea millefolium L.)