Ikan Tor soro memiliki beberapa permasalahan selama proses budidaya. Salah satunya adalah pertumbuhan yang lambat. Penggunaan probiotik diperlukan untuk meningkatkan daya tahan tubuh ikan dan efisiensi serapan pakan. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan skrining bakteri asam laktat dari saluran pencernaan ikan Tor soro sebagai kandidiat probiotik. Penelitian dilakukan selama 3 bulan di Laboratorium Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, UNS. Penelitian ini menggunakan ikan tor dari Pemalang, Jawa Tengah yang diambil saluran pencernaannya dengan menggunakan media MRSA+CaCO3 0,5 %. Isolat terpilih diuji melalui pewarnaan gram, uji aktivitas biokimia, dan skrining probiotik. Data dianalisis menggunakan ANOVA. Hasil penelitian menunjukkan bahwa isolat Tor2, Tor3, dan Tor4 yang berpotensi menjadi probiotik. Isolat tersebut termasuk bakteri basil gram positif dengan fermentasi glukosa positif, serta bersifat negatif pada uji katalase dan oksidase. Ketiga isolat tersebut berpotensi sebagai probiotik karena dapat tumbuh pada pH 2 dan garam empedu (0,3%), serta memiliki hidrofobisitas sedang dan kemampuan autoagregasi yang tinggi.